dermatolog juranda lublin

Skompresowane ex vivo podzbiory komórek T CD4 + znakowano CFSE i stymulowano PHA lub przeciwciałami anty-CD3 / CD28, autologicznymi CD4CCD8a. APC i IL-2 we wskazanych dawkach. (A) Przykład danych uzyskanych dla dawcy po stymulacji za pomocą PHA. Podział komórek mierzono w dniu 5. Kropkowane linie wskazują intensywność CFSE niepodzielonych komórek. Procentowy odzysk komórek (B) i procent niepodzielonych komórek (C) przedstawiono jako wartości średnie z 3 niezależnych dawców. Właściwości fenotypowe stymulowanych in vitro. NnTregs w porównaniu z komórkami w innych podgrupach komórek T CD4 + oceniano w dniu 10 po stymulacji in vitro za pomocą PHA lub przeciwciał anty-CD3 / CD28 w obecności IL-2 (100 IU / ml) . Po stymulacji in vitro wszystkie populacje wykazały znaczną ekspresję CD25 (Figura 6A i Tabela 2). Poziomy ekspresji CD25 pozostawały jednak znacznie wyższe w przypadku Treg i NnTregs w porównaniu z CD25 naiwną i antygenem doświadczanym przez antygen. Populacje komórek T. Ponadto, w przeciwieństwie do względnych poziomów ekspresji ex vivo, poziomy ekspresji CD25 w stymulowanych populacjach były wyższe w NnTreg niż w Treg. Proporcja komórek wyrażających HLA-DRp była zwiększona we wszystkich podgrupach po stymulacji, ale pozostawała względnie niska w NnTregs, zbliżona do tej, którą znaleziono w stymulowanych komórkach z naiwnej CD25. frakcja i znacznie niższa niż w przypadku Treg i doświadczonego antygenem CD25. stymulowane populacje. Podobnie jak naiwne CD25. Limfocyty T, względnie wysoki udział NnTregs zmniejszonej w CD45RA, szczególnie po stymulacji przeciwciałami anty-CD3 / CD28. Jednak część NnTregs utrzymywała ekspresję CCR7, szczególnie po stymulacji PHA. Ponadto większość NnTregs utrzymywała ekspresję CD62L. Stymulowane populacje Treg zawierały wyższy odsetek komórek wykazujących ekspresję CCR4 w porównaniu z CD25. Populacje komórek T. Ponadto, i znacznie, znacznie wyższy odsetek NnTregs eksprymował CCR4 w porównaniu z innymi naiwnymi limfocytami T CD4 +. Przeciwnie, ekspresja CCR5 była nieznacznie zmniejszona w populacjach NnTreg i Treg w porównaniu z odpowiednią naiwną i doświadczaną antygenem CD25. Populacje komórek T. Ekspresję CTLA-4, TGF-P LAP i GITR oceniano w 10-stym kulturach poststymulacji w stanie spoczynku lub 48 godzin po restymulacji przeciwciałami anty-CD3 / CD28 (Figura 6B). Co ciekawe, w populacjach spoczynkowych ekspresja GITR była niższa zarówno w Tregach, jak i NnTregs w porównaniu z ich odpowiednikiem CD25. populacje, podczas gdy LAP był umiarkowanie zwiększony, podobnie jak w przypadku CTLA-4. Jednak po ponownej stymulacji ekspresja tych cząsteczek była regulowana w górę we wszystkich populacjach, a zwłaszcza w Tregach i NnTregs. Figura 6 Fenotyp podgrup komórek T CD4 + po ekspansji in vitro. Posortowane populacje komórek T CD4 + stymulowano PHA lub przeciwciałami anty-CD3 / CD28 w obecności alogenicznych napromieniowanych komórek odżywczych i IL-2 (100 IU / ml). Dziesięć dni po stymulacji porcje różnych kultur znakowano wskazanymi przeciwciałami i oceniano przy użyciu sortera komórek FACSAria. Analizę danych przeprowadzono za pomocą oprogramowania FACSDiva. (A) Przykład danych uzyskanych od dawcy po stymulacji przeciwciałami anty-CD3 / CD28. Dane uzyskane od 3 dawców zestawiono w Tabeli 2. (B) Ekspresję GITR, TGF-P LAP i CTLA-4 oceniano 48 godzin później w hodowlach, które przeszły lub nie zostały poddane ponownej stymulacji przeciwciałami anty-CD3 / CD28. Liczby są średnią wartości intensywności fluorescencji otrzymanych od 3 dawców. Tabela 2 Fenotyp stymulowanych in vitro. Podzbiorów komórek T CD4 + zdefiniowanych ex vivo przez ekspresję CD25 i CD45RA Oceniono zdolność wzrastania kultur 10 poststymulacji po 10 dniach po dalszej stymulacji przeciwciałami anty-CD3 / CD28 pod nieobecność IL-2.
[przypisy: olx ostrowiec sw, misy tybetańskie, napięciowe bóle głowy ]