szczepionka pentaxim wycofana z rynku 2015

Zbadaliśmy również ekspresję Arf, inhibitora cyklu komórkowego, poprzez jego regulację stabilności p53, ponieważ Arf jest połączony z p16INK4a (Figura 1, A i B), a jego ekspresja wykazała, że wraz z wiekiem myszy wzrasta (18 ). Rysunek Ekspresja locus Ink4a / Arf zwiększa się wraz z wiekiem. (A) Względne wyrażenie. Stosunki (log2 scale) ekspresji inhibitorów cyklu komórkowego. stary (26 miesięcy) / młody (2,5 miesiąca). z 15 tkanek wykreślono. SEM. Każde oszacowanie reprezentuje średnią z 8. 32 ilościowych reakcji RT-PCR na niezależnych próbkach RNA pochodzących od 4. 6 myszy. * Minimalne oszacowanie stosunku stary / młody. (B) Absolutna ekspresja. Całkowitą liczbę kopii cząsteczek mRNA p16INK4a i Arf (log10 scale) na 90 ng całkowitego RNA RT-PCR z 15 tkanek myszy młodych (2,5 miesiąca) i starych (26 miesięcy) wykreślono graficznie. SEM. Fibroblasty zarodkowe myszy (MEF) we wczesnym (P4) i późnym (P7) pasażowaniu pokazano dla porównania. # Maksymalne oszacowane wyrażenie jest wskazane, ponieważ wyrażenie było poniżej poziomu wykrywania. Znaczny wzrost (3-krotny lub większy) w ekspresji p16INK4a obserwowano w 26 na 27 narządach analizowanych z 15 mysich i 12 szczurzych tkanek. Szczególnie duże (> 30-krotne) wzrosty względnych proporcji ekspresji RNA w starych i młodych tkankach (stosunek stary / młody) obserwowano w jelicie ślepym, nerce, jajniku i macicy (ryc. 1A, skala log2), podczas gdy najwyższą ekspresję w wartościach bezwzględnych zaobserwowano w płucach, węzłach chłonnych, nadnerczach i macicy ze starych zwierząt (ryc. 1B, skala log10). Średnia geometryczna współczynników stary / młody spośród 15 przeanalizowanych tkanek mysich wynosiła 9,7 (tj. Średnia tkanka wykazała około 10-krotny wzrost ekspresji p16 INK4a wraz z wiekiem). Ta wartość prawdopodobnie nie docenia rzeczywistego wzrostu średniej krotności, ponieważ w tkankach, takich jak trzustka i szpik kostny (Figura 1A), ekspresja p16INK4a była poniżej poziomu wykrywalności u młodych zwierząt. Dlatego w tych tkankach można określić jedynie minimalny szacunek krotności wzrostu ekspresji w tych tkankach. Podobnie, ekspresja Arf wzrosła severalfold w większości badanych tkanek, szczególnie serca, dwunastnicy, nerek i macicy (Figura 1, A i B). Średnia geometryczna stosunków starych / młodych Arfa była 3,5-krotnym wzrostem, podczas gdy następny najwyższy inhibitor cyklu komórkowego, p21CIP, wykazał jedynie 1,4-krotny średni wzrost. Dane te nie wykluczają określonej roli dla innej CDKI w konkretnej tkance; na przykład p15INK4b wykazywał około 5-krotny wzrost ekspresji w sercu ze starzeniem. Podobnie, nasze dane nie wykluczają możliwości, że niektóre z CDKI (np. P18INK4c [odniesienie 26] lub p27KIP [odn. 27]) są regulowane głównie w postprotokularyzacji ze starzeniem. Niemniej jednak, upregulacja Ink4a / Arf wydaje się silnie korelować ze starzeniem się organizmu w wielu typach tkanek, a ta znaczna i szeroko rozprzestrzeniona regulacja jest unikalna wśród głównych inhibitorów in vivo cyklu komórkowego ssaków. Pod względem bezwzględnej liczby transkryptów i ekspresji białka ekspresja p16INK4a i Arf była znacznie niższa w tkankach od myszy w wieku niż w pierwotnych hodowlach mysich zarodkowych fibroblastów (Figura 1B), nawet w pasażu 4 (mniej niż 14 dni in vitro). Ta obserwacja podkreśla, że sam akt hodowli silnie indukuje locus Ink4a / Arf (28), ale także sugeruje, że ekspresja Ink4a / Arf in vivo wzrasta tylko w stosunkowo małej części komórek w danej tkance (np. trzustka, Figura 2A i odnośnik 17). Aby określić, w których przedziałach narządów wzrosła ekspresja Ink4a / Arf, wykonaliśmy dodatkowe linie analizy, w tym analizę immunohistochemiczną (IHC) i kwantyfikację mRNA w oczyszczonych populacjach posortowanych komórek (Figura 2, A i B, i dane nie pokazane)
[hasła pokrewne: olx solec kujawski, młody zielony jęczmień gdzie kupić, mastocytoza ]