tomografia komputerowa rzeszów nfz

Zatem obniżenie CD1d jest selektywne i nie jest pośrednią konsekwencją zmian w dostarczaniu MHC klasy II na powierzchnię komórki. ważny wynik wcześniejszej pracy, który implikuje szlak biosyntezy MHC klasy II we właściwym przemycie CD1d na powierzchnię komórki (37). Figura 2 MIR1 i MIR2 indukują regulację w dół CD1d. (A) Komórki BJAB przejściowo transfekowano przez elektroporację wektorami ekspresyjnymi dla EGFP, MIR1-EGFP lub MIR2-EGFP. Trzydzieści sześć godzin po transfekcji komórki barwiono mAbami znakowanymi Zenon-1A APCa mysi przeciwko ludzkiemu CD1d. Poziomy HLA-A, HLA-B i HLA-C (MHC klasa I); HLA-DR (MHC klasa II); CD1d; i Fas są pokazane. Dla celów porównawczych pokazano również niepotraktowaną populację kontrolną. (B) Komórki HepG2, które wyrażają wysoki poziom endogennego CD1d, były stabilnie transdukowane wektorami retrowirusowymi kodującymi albo LACZ, albo znakowane flagą MIR2. Wybrano mieszaną populację stabilnych komórek, wybarwiono mAb znakowanymi Zenon-1A APCy i analizowano za pomocą cytometrii przepływowej. Jako odniesienie pokazany jest również histogram dla nieprzezroczystej kontroli. Niski poziom powierzchni CD1d na komórkach BJAB ogranicza zakres dynamiczny testu redukcji CD1d i może prowadzić do niedoszacowania wielkości hamowania. Dlatego do dalszych badań wybrano komórki hepatoblastoma HepG2, które mają wysokie poziomy endogennego CD1d na swojej powierzchni. Komórki HepG2 transdukowano retrowirusem kodującym funkcjonalny znacznik MIR2 znakowany flagą i neomycynę, a nieoporne komórki HepG2 wybrano jako populację masową. Jako kontrolę wybrano podobną populację po transdukcji retrowirusami lacZ / neo. Każdą populację komórek następnie analizowano za pomocą cytometrii przepływowej. Jak pokazano na Fig. 2B, lewy panel, poziomy CD1d były zmniejszone do 100-krotnie w stabilnych komórkach MIR2 w porównaniu z tymi w kontrolnych komórkach HepG2, które stabilnie wyrażają lacZ. Jest to nawet większe zmniejszenie niż zaobserwowano dla łańcuchów MHC klasy I w tych samych populacjach komórek (Figura 2B, prawy panel). Tak więc efekt MIR2 na CD1d wydaje się bardzo solidny. Próby wytworzenia stabilnych transduktantów HepG2 lub BJAB z MIR1 zakończyły się niepowodzeniem, ponieważ otrzymane transdukty szybko utraciły początkowo wysoki poziom ekspresji MIR1. Niemniej jednak, przejściowa ekspresja MIR1-EGFP wskazuje, że ma znaczną zdolność do obniżania poziomu CD1d (Figura 2A). Tak więc, regulacja CD1d, taka jak MHC klasy I, ale w przeciwieństwie do B7.2 i obniżenia poziomu ICAM-1 (33, 34), została zachowana u obu członków rodziny MIR. Redukcja poziomu MIR2 dla CD1d zmniejsza aktywację limfocytów T z ograniczeniem CD1d. Wpływ MIR-zależnej regulacji CD1d na aktywację limfocytów T z ograniczeniem CD1d badano w systemie kolektywnym in vitro. W tym układzie komórki BJAB, które stabilnie ulegają ekspresji lacZ lub MIR2 inkubowano z klonami komórek T T ograniczonych do CD1d w obecności. -GalCer i IFN-a. uwalnianie mierzono testem ELISA, jak opisano wcześniej (9). Jak pokazano na Figurze 3A, klony komórek T z ograniczoną ekspresją CD1d inkubowane z komórkami BJAB eksprymującymi MIR2 wykazały zmniejszone IFN-y. produkcji w porównaniu z klonami inkubowanymi z komórkami BJAB eksprymującymi lacZ. Efekt ten był spójny dla 3 różnych klonów limfocytów T z ograniczonym CD1d. Dalej, IFN-y uwalnianie indukowane przez komórki BJAB transfekowane MIR2 i lacZ monitorowano w obecności i nieobecności a-GalCer. Zgodnie z oczekiwaniami, IFN-y produkcja klonów komórek T była znacznie zwiększona w obecności. -GalCer w porównaniu z tą pod nieobecność (Figura 3B). Ponadto, podczas gdy ekspresja MIR2 doprowadziła do wyraźnego zmniejszenia IFN-y wydzielona w odpowiedzi na. -GalCer, nie zmieniła radykalnie poziomów IFN-y wytwarzane przez limfocyty T w nieobecności y-GalCer (Figura 3B)
[więcej w: malwa czarna, miód rzepakowy właściwości, olx zambrów ]