wysokie limfocyty i monocyty u dziecka

BJAB (Figura 6B) i komórki HepG2 (Figura 6C) wyrażające lacZ lub MIR2 znakowano przez 20 minut transfekcją S35 i gonserwowano w nieznakowanej pożywce przez 1, 2 lub 4,5 godziny w przypadku komórek BJAB lub 12 godzin. w przypadku komórek HepG2; następnie łańcuchy CD1d poddano immunoprecypitacji i zbadano za pomocą SDS-PAGE. Porównanie profili CD1d w komórkach z ekspresją MIR2 i lacZ nie ujawniło wyraźnej zmiany okresu półtrwania białek w obecności MIR2 w obu typach komórek (Figura 6B i Figura 6C, lewy panel). Co więcej, dodawanie podczas chodzenia chlorchiny, inhibitora zakwaszania lizosomów i proteolizy podczas łańcucha nie doprowadziło do znacznego nagromadzenia znakowanych łańcuchów CD1d (Figura 6B, rzędy 2 i 3 i Figura 6C, lewy panel, rzędy 3 i 4). ), chociaż częściowo wyzwolił wygląd łańcuchów MHC klasy I w tych warunkach (rysunek 6C, prawy panel). Zatem, w przeciwieństwie do MHC klasy I, CD1d jest ubikwitynowany i usuwany z powierzchni komórki w obecności MIR2, ale nie ulega zwiększonej degradacji. Odpowiednio, analiza cytometrii przepływowej całkowitych poziomów CD1d w stanie stacjonarnym (mierzona przez barwienie przeciwciał w komórkach permeabilizowanych z saponiną) nie ujawniła znaczącej zmiany poziomu CD1d, niezależnie od obecności lub nieobecności MIR2 (Figura 6D). Jednakże, jak można się było spodziewać, całkowite poziomy B7.2 i MHC klasy I były niższe w komórkach MIR2 niż w komórkach kontrolnych. Dyskusja Nasze odkrycie, że CD1d na powierzchni komórki ulega obniżeniu podczas litycznej infekcji KSHV i przez ekspresję białek MIR KSHV, stanowi pierwszy raport naszej wiedzy o modulacji systemu CD1d przez wirusa i sugeruje rolę tego układu w kontroli zakażenia KSHV . Proponujemy, aby obniżenie poziomu CD1d mogło wspomagać KSHV we wczesnych fazach nowej infekcji poprzez upośledzenie miejscowej aktywacji limfocytów T z ograniczonym CD1d, tym samym (a) zmniejszając bezpośrednie uwalnianie antywirusowych cytokin (np. IFN) do mikrośrodowiska, w którym wirusowe rozpoczęto replikację i (b) zmniejszanie sygnałów, które promują późniejszą adaptacyjną odpowiedź immunologiczną na wirusa. Byłoby to analogiczne do ról, które wcześniej proponowaliśmy dla MIR2 w oparciu o jego zniesienie aktywacji limfocytów T CD4 poprzez obniżenie poziomu B7.2 (33). Ponadto, ostatnie badania sugerują, że bezpośrednio po zakażeniu, ale przed ustanowieniem długotrwałego opóźnienia, mała ilość MIR2 może być wyrażana i przyczyniać się do szybkiej redukcji MHC klasy I powierzchni komórki i prawdopodobnie CD1d podczas początkowego ustanowienia opóźnienie (42). Niestety, niezdolność do zainfekowania myszy lub innych zwierząt doświadczalnych za pomocą KSHV (oraz fakt, że mysie CD1d nie może być obniżone przez MIR, jak pokazano na Suplementowej Figurze 1) sprawiają, że bezpośrednie testy in vivo tych prognoz są obecnie niemożliwe. KSHV nie jest jedynym wirusem, który moduluje wrodzony układ odpornościowy. Ostatnie badania CMV skupiły się na selektywnej modulacji receptorów aktywujących komórki NK przez białka wirusowe (24, 43). Uważa się, że nie tylko zaburza to lizę komórek zakażonych komórkami NK, ale także opóźnia aktywację komórek NK odpowiedzi adaptacyjnej, a następnie polaryzację odpowiedzi limfocytów T pomocniczych (44). Limfocyty T z ograniczonym CD1d lub limfocyty T NK mogą reprezentować układ równoległy do aktywacji komórek NK do szybkiego wykrywania infekcji wirusowej i wzmocnienia odporności adaptacyjnej. Blokowanie aktywacji limfocytów T z ograniczeniem CD1d może również modulować aktywację komórek NK (45). Jeśli tak, KSHV może osiągnąć pośrednio to, co CMV osiąga przez bezpośrednią blokadę receptorów aktywujących NK na zakażonych komórkach. Na pytanie o rolę układu CD1d w zwalczaniu infekcji wirusowej pozostaje wiele pytań
[hasła pokrewne: migotanie przedsionków leczenie, olx solec kujawski, młody zielony jęczmień gdzie kupić ]